Unidad de Citometría de Flujo

Introducción

La citometría de flujo es una técnica que permite medir y obtener información sobre las características ópticas de células o partículas en suspensión al ser sometidas a una fuente de luz láser.

Esta medida se realiza sobre cada partícula individual en base la dispersión de la luz frontal (forward scatter), relacionada con el tamaño celular, la dispersión lateral 90 grados (side scatter), relacionada con la estructura interna y con la complejidad citoplasmática, y a la emisión de fluorescencia de las partículas iluminadas por la luz láser.

La citometría de flujo nos permite estudiar las características fenotípicas de las poblaciones celulares, imnunofenotipo, utilizando anticuerpos monoclonales fluorescentes, así como las características funcionales utilizando para ello las diferentes sondas fluorescentes disponibles.

La citometría de flujo es un sistema rápido, pudiendo analizar miles de células/minuto, y multiparamétrico, permitiendo el análisis de varios parámetros celulares simultáneamente.

Servicios

• Asesoramiento en la preparación de protocolos citométricos. Diseño de paneles multicolor. Procesamiento de las muestras.
• Inmunofenotipado de poblaciones sanguíneas humanas.
• Inmunofenotipado de poblaciones sanguíneas de diferentes especies animales, ratón, rata, cerdo, conejo.
• Estudio de poblaciones celulares en muestras de biopsias.
• Estudio de procesos fisiológicos a nivel celular. Ciclo celular, Apoptosis, Marcadores mitocondriales, Niveles de Ca++, Estudio del daño al ADN, Estrés oxidativo. Estudio de senescencia.
• Estudio de niveles de citoquinas intracelulares.
• Separación celular en muestras de cultivos celulares así como en biopsias de diferentes tejidos. Separación células transfectadas con vectores fluorescentes. Separación de poblaciones leucocitarias de interés.
• Estudio de poblaciones celulares utilizando la imagen con el citómetro Amnis ImageStream.
• Análisis de los datos citométricos generados en el servicio con software específico.
• Curso básico de citometría a usuarios.

Equipamiento

CITÓMETROS ANALIZADORES

• BECTON DICKINSON: 3 Láseres: 405, 488, 640nm. 8 Parámetros fluorescentes y 2 parámetros morfológicos (FSC, SSC)
• LSR Fortessa X-20. BECTON DICKINSON:5 Láseres: 355, 405, 488, 561, 640nm.18 Parámetros fluorescentes y 2 parámetros morfológicos (FSC, SSC).
• Citómetro de imagen Amnis ImageStream.

SEPARADOR CELULAR

• FACSAria III. BECTON DIKINSON: 5 Láseres: 355, 405, 488, 561, 640nm. 16 Parámetros fluorescentes y 2 parámetros morfológicos (FSC, SSC).

SEPARADOR CELULAR MAGNÉTICO

• MACSxpress Separator. MILTENYI BIOITEC S.L.

SOFTWARE DE ANÁLISIS

• Software de Análisis archivos citométricos
• ModFit LT. Software Análisis Ciclo Celular
• FACSuite, DIVA, IDEAS

Equipo Humano

Dra. Guadalupe Herrera
Téc. Mª Ángeles Pinto Sánchez