Unidad de Microscopia Confocal

Introducción

La microscopía confocal se encuentra englobada dentro de la microscopía óptica, concretamente de la microscopía de fluorescencia. El desarrollo de nuevas sondas fluorescentes y el aumento de resolución que proporciona la utilización de la microscopía confocal, han hecho posible que la fluorescencia sea una de las técnicas más utilizadas en la actualidad.

Servicios

• Asesoramiento en la preparación de experimentos para microscopía confocal, procesado, obtención y presentación de resultado.
• Detección mediante sondas fluorescentes de procesos tisulares, celulares y subcelulares.
• Estudios de colocalización de marcadores.
• Análisis de materiales.
• Monitorización de moléculas.
• Captación de las imágenes, posterior procesado y análisis de las mismas.
• Captación de secuencias seriadas y posterior reconstrucción tridimensional.
• FRET (transferencia de energía por resonancia de fluorescencia).

Equipamiento

Microscopio confocal espectral LeicaTCS SP8, microscopio invertido de alta gamma completamente motoritzado. Dispone de un sistema de detección espectral con tres detectores PMTs y un detector HyD, además del detector para luz transmitida. También posee un láser blanco, White light laser (WLL2), que permite cubrir la totalidad del espectro de excitación (470nm – 670nm). El microscopio cuenta con tres filtros de fluorescencia, filtro de excitación azul (GFP), filtro de excitación verde (CY3), y filtro de excitación UV (DAPI). Contiene los siguientes objetivos: 5x, 10x, 20x (aceite, glicerol, agua), 40x (aceite) y 63x (aceite). Posee también un sistema de incubación sobre platina que permite el control de temperatura, humedad y nivel de CO₂en la muestra. 

Microscopio confocal espectral LeicaTCS SP2, láser ultravioleta, control de temperatura y CO₂. Cuenta con un microscopio invertido DMIRB para campo claro en luz transmitida y fluorescencia en luz incidente con una dotación óptica para contraste interferencial. Incorpora tres filtros de fluorescencia: excitación azul para FITC, Cy2, etc., excitación verde para TRITC, Cy3, etc. y excitación UV para HOECHST o DAPI, etc.

El sistema incluye 4 fuentes láser: rojo lejano (HeNe 633 nm), rojo (HeNe 543nm), verde (HeNe 488 nm) y azul (Ar 351nm,364).

Microscopio para estudios en célula viva, DMi8 de Leica, microscopio invertido completamente motorizado. El DMi8 incorpora una columna de luz transmitida abatible. La fuente de iluminación de fluorescencia son LEDs, Incluye 16 cubriendo el rango 365-770 nm. Los filtros que posee son para DAPI (Excitación 350/50), GFP (Ex. 470/40), TEXAS XARXA (Ex. 560/540), FURA (Ex. 340/26,380/11) y el par CFP/YFP (Ex. 435/25, 500/20) para FRET. Cuenta con los siguientes objetivos 10x, 20x, 40x, 20x (aceite), 40x (aceite) y 63x (aceite). Posee también un sistema de incubación sobre la platina para controlar la temperatura, CO₂ y humedad.

Microscopio invertido de investigación Leica DMI 3000, con fluorescencia y contraste de fases de larga duración con iluminador de haluro con 2000 horas de duración y transmisión por fibra óptica. Filtros para DAPI, fluoresceína y rodamina. Objetivos: 10x, 20x, 40x y 63x. Sistema de adquisición de imágenes con cámara digital de alta resolución y sensibilidad.

Microscopio óptico de campo claro, 4x, 10x, 20x, 40x (aceite) y 100x (aceite).

Equipo Humano

Sonia Priego Villanueva